熒光激發塊噪音終結者
熒光激發塊噪音終結者
由尼康一種創新的熒光濾波器塊設計有助于消除發生在熒光顯微鏡光學路徑☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；，極大地提高了發射信噪比殘余雜散光的可能性ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ。稱為噪聲終結者♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃，這種技術會指示偏離雜散光遠離物鏡聚光的路徑⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺，從而導致圖像對比度的顯著改善✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。這種互動式的教程演示如何噪音終結者技術功能ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。
教程初始化含有激發和屏障激發塊ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ，以及一個二色鏡❣❦❧♡۵，出現在窗口中的傳統的熒光濾波器光學塊（從倒置顯微鏡）☾☽❄☃。來自光源的光子（黃色球）從窗口的右手側進入過濾塊并通過激發濾光片☾☽❄☃，它是一個帶通濾波器❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，允許主要510和560納米（綠色光）之間的波長穿過⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。離開激發濾光片（綠球）的光被偏轉在由二色鏡90度角和*多的目標和標本ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。一些短和更長的波長☈⊙☉℃℉❅，其能夠通過激發濾光片的（在教程作為紅色和藍色球體表示）不被二色反射鏡偏轉并通過☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；。這些光子✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥，這是在熒光顯微鏡噪聲的主要來源的一部分ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ，從光學塊的內部反射㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉，并能夠穿過屏障激發塊以傾斜角度♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃，*終到達檢測器ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。
為了操作教程❣❦❧♡۵，使用照明強度滑塊來調節進入激發塊的光學模塊的光子數ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。該激活噪音終結者復選框（默認禁用）可以啟用展示尼康導流技術♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃，有效地捕捉光子❣❦❧♡۵，否則將產生噪音♀☿☼☀☁☂☄。當噪音終結者復選框被激活①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯，光子流經光學塊插入終止子管的后部㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂，并通過中性密度材料吸收❣❦❧♡۵，從而逸出的顯微鏡的光路㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。不得到由中性密度材料吸收任何的光被反射到終止子管在那里*終分散的末端✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。該顯微鏡配置單選按鈕❣❦❧♡۵，可以采用光學塊和噪聲終止子取向為之間選擇倒立（默認）的組織培養物或傳統直立式儀器㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。使用教程速度滑塊通過光學塊⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓，以控制光子流的速率✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。
任何熒光顯微鏡的基本特征是提供一種機制⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤，以選擇性地過濾照射㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂，隨后通過使用第二濾波器❣❦❧♡۵，使在暗背景上具有*大靈敏度的圖像形成弱得多的熒光發射信號的隔離檢體的激勵㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。在生物樣本的局部探針濃度是如此之低✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥，只有激發光的一小部分是由熒光物質吸收了許多實驗✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。那些熒光團是能夠吸收照明的數量①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯，這將發射次級熒光的百分比⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ。此外⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓，甚至更低❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。所得熒光發射的亮度級將介于幅度小于該照明的3至6和命令⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。因此ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，在熒光顯微鏡的根本問題是ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，產生的樣品的高效率照明⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯，同時捕捉微弱的熒光發射被有效地從更強烈的照明帶分離①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯。這些條件是通過對激發塊坐標基于該二色分光器的操作和性能的激發和發射要求的組合滿足現代熒光儀器❣❦❧♡۵。
后面的反射光熒光顯微鏡二色分光鏡（反射鏡）的功能的原則在在紅色（620至660納米）的可見光光譜的波長的綠色區域（550納米）和熒光的教程激發光照進行了概述ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。一種高強度光源輸出一個寬的激發波長的光譜在高磁通密度（通常覆蓋大部分的紫外線和對整個可見光譜的）❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，它穿過所述照射器和*遇到選擇適當的波長帶為激發濾波器（標有激勵在本教程激發塊）✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。在這種情況下♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃，激發塊通過510和560納米之間的光的波長具有高效率⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ，但也允許其它波長通過在一個較小程度♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃。激發光下一個到達的二色反射鏡㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦，并反射到物鏡后孔✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥，以形成照明該沐浴試樣的錐體✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。該二色鏡被定位在光路成45度角ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，并設計成選擇性地反射490和565納米（基本上藍綠色和綠色波長）之間的波長☾☽❄☃，而同時發射兩個短和更長的波長ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ。（奧林巴斯顯微鏡）
因為光的僅一個窄的帶寬是由二色鏡反射⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺，照射波長小于490納米⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤，并且長于565納米的管理通過該激發濾光片也通過二色鏡發射♀☿☼☀☁☂☄。需要注意的是激發光的反射是不是100％的效率ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ，因此ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ，少量的綠色光通過二色鏡穿過而不被反射①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯。此外♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃，并非所有的光具有波長高于565或低于490納米的通過反射鏡被發送✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。這種光的一小部分是由通過物鏡的反射鏡并到達樣品反射✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。通過二色鏡從激發濾光片透射光的一部分被平坦黑色涂層在激發塊塊的內部被吸收✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥，但一些反射從表面并穿過所述屏障激發塊以斜角✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴，有助于熒光背景噪聲❣❦❧♡۵。