徠卡顯微鏡目鏡 物鏡和光學畸變
對于大多數顯微鏡應用✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅,通常僅由用戶調整的兩組光學元件❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,即物鏡和目鏡웃유ღ♋♂。當然ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ,這是假設顯微鏡已經被校正了Koehler照明✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥,在此期間調節了聚光鏡和隔膜❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。
本文介紹了目鏡的組成部分ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ,以及如何正確調整目鏡✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,以適應您的眼睛✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。為了實現物鏡❣❦❧♡۵,我們將研究光學畸變和糾正以克服這些異常的四個*常見的物鏡☾☽❄☃。
目鏡和物鏡由顯微鏡制造商設計ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,以組合和光學互補✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。如果由于任何原因您正在更換顯微鏡之間的目鏡或物鏡✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,這是應該記住的✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。顯微鏡的物鏡和目鏡必須相互協調工作☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,以獲得*佳的標本成像웃유ღ♋♂。當購買完整的顯微鏡時♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃,光學元件將被設計和匹配㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,以相互補充⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ,為用戶提供*佳的觀看條件ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。或者☈⊙☉℃℉❅,如果您正在組裝定制的研究級顯微鏡㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,則提供的物鏡選項將決定哪些目鏡適合于物鏡范圍㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,反之亦然☈⊙☉℃℉❅。
目鏡
目鏡是我們看到標本的*終圖像的光學透鏡(見圖1)⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。這些光學器件有時被稱為“眼鏡”或“眼睛”ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。除了取決于物鏡選擇的放大倍率之外✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅,還有一個額外的放大系數✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,從目鏡中考慮①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯,通常為10倍放大倍數❣❦❧♡۵。目鏡看起來像顯微鏡的簡單的光學元件⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ。雖然一些基本的目鏡是由一個金屬管和透鏡頂部和底部組成的❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣,但是許多研究級目鏡由一組透鏡組成⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾,可以相互配合使用☾☽❄☃,以便將您的樣品的正確視圖作為以及贊美物鏡的屬性⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。
不管目鏡的部件設計如何♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃,在金屬外殼的兩端只有兩個透鏡可供用戶看見⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯。將*終圖像(*接近眼睛)的透鏡稱為“眼鏡”⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,而相對端的鏡片(面向顯微鏡主體)被稱為“鏡頭”ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。
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眼鏡周圍㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,通常會發現橡膠或塑膠眼罩(見圖2)❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。這些功能有幾個功能㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。它們將阻擋一些環境光❣❦❧♡۵,從而更清晰地觀察到感興趣的標本❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。此外❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,他們約束用戶到目鏡的*佳距離☈⊙☉℃℉❅。如果戴眼鏡㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂,則可以簡單地將其回滾到目鏡的頂部或完全取下웃유ღ♋♂。
顯微鏡衛生詞:如果您在共享的實驗室或設施中使用顯微鏡①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯,衛生和清潔是重要的因素ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ。一個重要的考慮因素是眼睛感染✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。如果您不幸遇到眼睛感染✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥,您應該避免使用共享顯微鏡ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ,直到完全清除⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。眼睛感染可能是高度傳染性的㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,容易傳播到其他顯微鏡用戶㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。不管眼睛的健康如何⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾,您應該始終將目鏡和眼罩(以及整個顯微鏡)放置在干凈的狀態㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,為下一位用戶準備好☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;。
目鏡屈光度調整
目鏡需要調整以適應用戶的愿景⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯。這被稱為“屈光度調整”☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,它用于校正眼睛之間的焦點和視覺差異(參見圖2)❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。除非您具有**的正常視力(也稱為“20/20視力”)㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,否則進行簡單的調整將可以更清晰地查看標本ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。在進行屈光度調整之前✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥,應對目鏡之間的距離進行簡單的物理改變(假設您使用雙目顯微鏡)以適應用戶的解剖❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。雙目目鏡安裝在水平的“滑塊”上ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ,兩個目鏡移動以適應眼睛之間的距離☾☽❄☃。或者❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣,每個目鏡安裝在分開的殼體中ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,該殼體可以半圓形旋轉移動以匹配用戶的眼睛之間的距離♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃。
一旦物理距離正確設置⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾,則可以進行屈光度調整✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。如果您檢查每個目鏡웃유ღ♋♂,您會注意到❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣,其中至少有一個在金屬體或外殼周圍有一個滾花環(另一個也可以是固定的目鏡)㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。只能通過固定的目鏡向下看⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓,使用顯微鏡的主要對焦輪使您的標本變焦✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。將眼睛靠在固定的焦距目鏡上ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ,并使用屈光度可調目鏡觀察樣本☈⊙☉℃℉❅。在保持標本的原始焦點的同時ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ,慢慢地轉動露珠環⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,直到樣品進入尖銳的焦點✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。當你雙眼打開時①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯,樣本現在應該是尖銳的焦點☈⊙☉℃℉❅。一旦進行了屈光度調整⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤,對于所選擇的每個物鏡❣❦❧♡۵,設置是相同的ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。
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光學像差
在顯微鏡(在本文的范圍內)方面ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,有兩種主要類型的光學像差:色差和幾何像差웃유ღ♋♂。幾何(也稱為“單色”或“球面像差”)也稱為“塞德爾像差”✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。Philipp Ludwig von Seidel(1821-1896)是德國數學家❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣,1857年✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥,他確定了五個組成幾何像差(球面①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯,昏迷⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾,散光ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,畸變和場曲)㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。通常㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂,幾何/單色/塞德爾像差由于透鏡的結構和幾何形狀以及光線穿過透鏡時與折射和反射相關的方式而發生ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。
色差主要是由于鏡片的材質而發生的⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。白光由許多不同的波長/顏色組成ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,當它通過凸透鏡時♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃,它被分成其組件❣❦❧♡۵。這種波長分裂意味著一旦光通過透鏡⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,分量顏色就不會聚焦到彼此相同的會聚點✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。
物鏡
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制造和校正顯微鏡物鏡以在每個光學部件內考慮這些像差中的一個或多個ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ。包含在物鏡鏡筒上的信息(除放大倍率✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥,物鏡類型❣❦❧♡۵,數值孔徑(NA)等)外☈⊙☉℃℉❅,還將有關于光學校正的信息(見圖3)☾☽❄☃。
盡管有許多光學校正可用⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓,本文將介紹可能遇到和使用的四個*常見的錯誤❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。目鏡除了目鏡外❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣,看起來很簡單웃유ღ♋♂。物鏡兩端的兩個透鏡被稱為*靠近試樣的“前透鏡”和“使用前不可見的”后透鏡“ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ,因為它面向顯微鏡的主體⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。大多數物鏡包括相對復雜的一系列透鏡㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,每個透鏡彼此互補并且被設計為校正其它失真的光學像差✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。
消色差物鏡
*常修正的顯微鏡物鏡是“消色差”物鏡♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃。這些通常由物鏡桶上的縮寫“Achro”或“Achromat”來標識①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯。這些物鏡被校正為被稱為“軸向色差”的光學現象⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。當白光通過凸透鏡時❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,發生這種像差⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。結果❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,白光分為紅色❣❦❧♡۵,綠色和藍色的“分量波長”⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ。這種分裂意味著波長不會聚焦在光軸上的同一焦點(圖4)ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。
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如果使用未校正軸向色差的物鏡觀察樣品☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,則在樣品周圍可見有彩色條紋以及圖像模糊☈⊙☉℃℉❅。針對兩種波長(紅色和藍色)校正消色差物鏡❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,使這些顏色與綠色波長大致相同的焦點①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯。
平場消色差物鏡
在“平場消色差”物鏡中找到了下一個更正⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。這些通常通過物鏡桶上的縮寫“plan Achromat”或“Achroplan”來標識❣❦❧♡۵。除了對軸向色差進行校正之外❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣,這些目的也被校正為稱為“場曲率”的光學現象❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。當光通過彎曲透鏡時ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ,會發生這種現象⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。投影圖像導致樣本的曲線圖⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。如果使用不對場曲率進行校正的物鏡觀察樣本⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,則會導致整個視場的不均勻焦點㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。視野的邊緣或中心可以聚焦☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,但不結合⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。雖然這通常不是常規查看和檢查標本的問題✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅,如果您希望捕獲圖像以用于出版ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ,例如可能更有問題⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。在這種情況下❣❦❧♡۵,建議使用平面消色差物鏡進行平場校正和圖像視圖中的均勻焦點✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。
半消色差物鏡
修正物鏡的下一級是一個稱為“球面像差”的異常㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。考慮到可能通過彎曲透鏡的所有光波㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,通過透鏡中心的波將比通過彎曲透鏡邊緣的波折射✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。在通過透鏡之前平行的光波不會聚到單個焦點ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,而是沿著光軸分布為不同的點(參見圖5)⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。
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針對該光學像差而修正的物鏡被稱為“半無色”或“螢石”物鏡❣❦❧♡۵。這些由物鏡桶上的縮寫“Fluar”⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,“Fluor”ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ,“Fluo”或“Fl”標識❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。術語“螢石”可以追溯到這樣的透鏡是由氟化鈣礦物的螢石制成的✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。在商業上✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,這種礦物也被稱為“螢石”✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,并且仍然用于制造一些半消色差透鏡☾☽❄☃,盡管它們大多數現在由合成材料制成㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。對于一個或兩個分量顏色校正半消色差物鏡①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯,并且校正確保不同的光波被聚焦在一起❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,如所謂的在光軸上的“*小混淆圈”㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。
除了上述桶縮略語웃유ღ♋♂,還有“Plan FL”或“Plan Fluor”指定的物鏡ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。這些物鏡不僅用于球面像差而且用于場曲率⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。
消色差物鏡
校正物鏡(反映在這些光學成本中)的*高水平是“消色差”物鏡☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;。這些由縮寫“Plan Apochromat”ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,“PL APO”或“Plan Apo”標識在物鏡桶上(見表1)㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。這些物鏡對于場曲率(因此縮寫為“Plan”)進行了校正⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤,并且對于紅色웃유ღ♋♂,綠色和藍色分量波長進行了色度校正ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ。此外①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯,復消色差物鏡也可以針對*多三個波長進行球面校正⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。在復消色差鏡頭中發現的高水平校正導致與物鏡的等效放大率相比較較高的NA♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃,校正較少ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。
徠卡矯正物鏡
可以通過以下鏈接找到Leica校正物鏡的不同類別的概述(見表1)⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。此外ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ,Leica可以通過填寫本頁上的在線表單來幫助您找到應用程序所需的確切物鏡❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。
用于Leica物鏡的進一步縮寫ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ。
BD | 用于明場/事件光暗場 |
PH | 相位對比度物鏡 |
RC | 反射對比度物鏡(僅與DM R) |
P✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,POL | 低應變⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺,用于定量極化 |
/ | 不適用于入射光ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,熒光除外 |
LMC | 調制對比度物鏡(僅適用于Leica DM IRB) |
表2:特別適用于特定對比方法的物鏡被相應標記⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。
油 | DIN / ISO標準浸油 |
w | 水 |
GLYC | 甘油 |
IMM | 任何其他或多于一個浸沒式介質 |
表3:物鏡表示必須用于某一物鏡的浸沒式介質✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。
CORR | 物鏡矯正項圈 |
L | 物鏡是*長的免費工作距離 |
6位代碼 | 標志著徠卡微系統訂購的物鏡 |
表4:徠卡物鏡上提到的更多標簽㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。




