徠卡顯微鏡在小鼠犁鼻急性組織切片制備成像遙感信息素
彼得卡爾森和馬丁Lüscher的所使用的術語的信息素首次在1959年描述用于種內通訊的化學物質ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。 信息素是易失性或非易失性的短壽命的分子分泌的和/或包含在生物體液ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ,如尿㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂,已知為外激素的主要來源是液體♀☿☼☀☁☂☄。費洛蒙通信牽連的各種關鍵的動物模式ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,如親屬關系❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,階層organisations3和性的相互作用✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,并因此直接與給定物種的生存相關✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。 在小鼠中⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺,以檢測信息素的能力通過犁鼻器(VNO)♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃,位于鼻腔的堿基配對的結構㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,主要介導ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ,并封閉在軟骨質膠囊中❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。 每個VNO具有管狀的形狀⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ,其管腔允許與外部世界的化學接觸☈⊙☉℃℉❅。 感官神經上皮主要由犁鼻器雙極感覺神經元(的VSN)的⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。 每個VSN延伸的單個枝晶在一個大的樹突狀旋鈕軸承高達100微絨毛牽連化學檢測終了的內腔❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。 無數的VSN亞群存在⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。 他們是由他們表達㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,從而可能通過配體(S)⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓,他們認識到化學感受器分化⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ。 兩個主要的犁鼻器受體家族웃유ღ♋♂,V1R相和V2R中㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,是由240和120個成員分別由和表示在神經上皮不同的層次⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。 嗅覺受體(OR)和甲酰肽受體(FPR中)也表達的VSNⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。
不論這些神經元亞群的使用相同的下游信號通路♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃,用于檢測信息素是未知的ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。 盡管鈣滲透性通道(TRPC2)目前在成熟神經元的微絨毛發揮了重要作用TRPC2獨立的轉導途徑提出了建議✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。 由于高數目的神經元亞群和器官的特有形態中♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃,存在于VNO信令元素的藥理學和生理學研究是復雜的ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ。
在這里☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,我們提出了一個尖銳組織切片制備鼠標VNO的執行鈣成像調查♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃。 這種生理方法允許觀察⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,在生物體組織預先裝入的Fura-2AM⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ,鈣染料的VSN的一般或個別亞群⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,自然環境⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。 這種方法也便于學習任何GFP標記信息素受體和能適合使用其它熒光鈣探針㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。 作為一個例子❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣,我們在這里使用一個VG鼠標線⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,其中的信息素V1rb2受體的翻譯是由一個多順反子策略鏈接到綠色熒光蛋白的表達㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。

圖片:切口從BrechbühlJ等:成像遙感信息素在小鼠犁鼻急性組織切片制備
觀看視頻 http://www.jove.com/video/3311/imaging-pheromone-sensing-mouse-vomeronasal-acute-tissue-slice