奧林巴斯顯微鏡：偏光顯微鏡對中
在偏振光顯微鏡中❣❦❧♡۵，適當地對應的各種光學和機械部件是一個關鍵步驟之前必須進行單獨的交叉的偏振器之間進行定量分析㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉，或組合使用相位差板和補償㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。幾個基本元件必須正確地定位相對于顯微鏡光軸與其他的機械和光學部件㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。一系列對準下面列出的步驟用于偏振光顯微鏡普遍使用⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ，并應適用于學生和研究級儀器ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ。
在圖1 中示出的偏振光顯微鏡的基本光學和機械部件⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。在最低限度ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ，這些顯微鏡必須配備兩個線性偏振元件㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。一個偏振片（稱為圖 1 中的偏光片）被置于下面的 載物臺 聚光鏡 內或以下☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；，或覆蓋在基顯微鏡光源出射端口ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。上面安裝物鏡后孔徑的第二偏振片（稱為圖1 中的分析儀）⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯，無論是在物鏡轉換器插槽內或位于所述框架和所述觀測管之間的中間管☈⊙☉℃℉❅。許多偏振光顯微鏡都配有一個帶刻度的圓形的 載物臺 ❣❦❧♡۵，可以通過360 度旋轉❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣，為快速變化的偏振器和分析器的透射軸相對于試樣取向웃유ღ♋♂。此外♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃，在偏振光顯微鏡的目鏡應該有一個十字分劃板❣❦❧♡۵，以確定的光電場的中心和軸ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。先進的顯微鏡包括伯特蘭透鏡錐光觀察 物鏡 后孔集中在干擾模式❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣，但這個配件是不是絕對必要的常規觀測㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。最后㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂，偏振光顯微鏡應該有一個附件插槽中的物鏡轉換器或中間管可以插入到相位差板或補償雙折射標本進行定量分析⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯。
偏光顯微鏡對準程序
在偏光顯微鏡對應的第一步是建立適當的的科勒照明與偏振器和分析器的光學路徑中刪除☈⊙☉℃℉❅。在 載物臺 上放置一個明場（染色）標本❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，并觀察位置旋轉10 倍的 物鏡 ㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。聚焦樣本的 物鏡 和視場光闌光圈到最小設置♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃。帶部分閉合的視場光闌作為試件在同一平面上ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ，通過調節 聚光鏡 高度成為大家關注的焦點☾☽❄☃。使用 聚光鏡 定心螺絲平移圖像視場光闌光圈開目鏡十字線的中心⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯，然后打開隔膜❣❦❧♡۵，直到葉子外面視⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。
之前插入偏光器和分析儀①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯，360 度圓形旋轉 載物臺 應該集中到10 倍的 物鏡 ✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅，使標本將保持在視場的正中心☈⊙☉℃℉❅，當他們正在旋轉①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯。的 載物臺 和 物鏡 為中心ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ，也是一個重要的步驟ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，用于定量分析的雙折射和光程差❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。甲大部分的圓形的顯微鏡 載物臺 樞軸三個可調的標簽❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，一個在前面的 載物臺 ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。正確定位和其他兩個等距隔開在120 度的角度的后部附近的 載物臺 ㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。該 載物臺 可分鐘調整到后樞軸銷為中心轉動中心螺釘㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。首先通過一個小的圓形功能定位在一個區域沒有其他分心的結構就比較簡單了明場標本㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。接下來ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ，重新定位所選擇的特征目鏡十字線中的視場的中心（參見圖2 （ a ））㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。旋轉 180 度的 載物臺 ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ，通過目鏡十字線的垂直（圖2 （ b ））的一個重疊的♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃，直到中心的試樣功能❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。使用樞軸螺絲①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯，搬遷標本特征的距離大約有一半的十字中心（圖 2 （ c ））ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。最后ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ，移動樣品特征的十字線中心（圖 2 （ a ））ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，重復的排列順序⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。經過幾個周期后⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ，試樣的特征應在視場的中心⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺，作為 載物臺 旋轉㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。
在 載物臺 已經圍繞相對于顯微鏡的光學軸與安裝在光學火車10 倍的 物鏡 ⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺，其他 物鏡 （4 倍☾☽❄☃， 20 倍♀☿☼☀☁☂☄， 40 倍㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉， 100 倍）應依次為中心的 載物臺 ⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。顯微鏡有定心的 物鏡 包含一對艾倫（或類似的驅動器）物鏡轉換器的固定螺絲ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ，翻譯的目的在其座位側面㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。每個 物鏡 可以使用上面描述的過程為圓形的 載物臺 ☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；，通過使用由生產商的客觀的定心工具中心❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。準確的定心的 載物臺 和所有 物鏡 是至關重要的偏振光進行定量分析㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉，并在 載物臺 上旋轉的視場中的特定功能ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，避免了運營商失去ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。完成定心程序后⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤，審查的步驟♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃，以確保在顯微鏡上的所有的 物鏡 都準確地集中❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，然后再繼續ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。
建立科勒照明和定心的顯微鏡載物臺和 物鏡 是很容易在明視場模式下完成的（但也可以進行與在偏振光模式的雙折射的試樣✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅，如有必要）❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。要繼續進行對應的偏振分量⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯，安裝在 聚光鏡 或在顯微鏡的基礎上在光源出射口的殼體的固定或可旋轉的偏振元件웃유ღ♋♂。許多偏振光顯微鏡都配有一個固定的偏振片具有發送振動軸面向東- 西✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴，或左到右站在前面的顯微鏡時⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。其他顯微鏡ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ，可旋轉 180 度或 360 度的偏振器ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ，并經常被安裝到的幀❣❦❧♡۵，以漸進的取值范圍為 1 到 90 度的增量㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。確保偏振片正確固定到位ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ，無論是永久固定到其持有人或放置在零的位置☾☽❄☃。必須被設置為在該步驟中的東 - 西的方向的偏振器傳輸的振動軸✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。
將分析儀顯微鏡物鏡轉換器或中間管⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。幾乎所有的研究級偏光顯微鏡分析儀安裝在一個矩形框ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，使元件的旋轉通過180 度或 360 度的旋轉⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ。學生顯微鏡通常有一個固定的分析儀（以及作為一個固定的偏振器）ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，以減輕交叉偏振器對應ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。旋轉分析儀⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺，同時檢查雙折射標本在 載物臺 上用10 倍的 物鏡 ⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。當分析儀和偏振器的透射軸交叉在一個90 度的角度✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥，最大的檢體的雙折射（相當于試件最大亮度）應觀察到一個非常黑暗的背景上（被稱為一個條件⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤，最大消光）☈⊙☉℃℉❅。在正交偏振光照明ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ，振動分析儀軸應該是面向南北或前回☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；，而站在前面的顯微鏡⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。最大的滅絕只能完成一個關鍵的評估❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，同時通過顯微鏡目鏡觀察的背景強度웃유ღ♋♂。請記住⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯，在這一點上①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯，最大的滅絕只表示偏振器交叉①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯，但不保證其傳輸軸是完全面向東☈⊙☉℃℉❅，西和北南✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。在下一步驟中處理后一方面☾☽❄☃。
偏振器和分析器軸對準的校準①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯，可以通過以下兩種方法之一✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。許多制造商提供了他們的研究級顯微鏡偏振光顯微鏡定位板協助對準正交偏光ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。這些板塊中含有一個完美切割的矩形薄板雙折射晶體具有光軸的晶體的長邊平行（見圖3 ）①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯。晶體安裝平載玻片上✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴，專為使用圓偏振光顯微鏡 載物臺 ☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；。當長軸晶體取向在45 度角的偏振器和分析器傳輸的方位角（圖圖 3 （ a ））❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣，最大的雙折射在偏振光下觀察✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。向偏振器軸旋轉的晶體逐漸降低雙折射性的水平（圖 3 （ b ））㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉，直到它被消除時☾☽❄☃，長軸方向是完全平行的偏振片透射方位（水平目鏡十字線❣❦❧♡۵，請參閱圖 3 （ c ）） ❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。
在這一點上ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，液晶的雙折射是完全熄滅⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓，應該是從背景難以區分ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ。需要注意的是晶體的輪廓在圖3 （ c ）是人工的☾☽❄☃，并且包括僅用于說明的長軸平行于偏振器的方位角♀☿☼☀☁☂☄。如果偏光器和分析儀無法準確定位☾☽❄☃，在東西和南北方向（分別）ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，然后晶體長軸平行目鏡十字線時完全熄滅的雙折射ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。在這種情況下㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉，晶體的長軸旋轉❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，直到它是平行于水平的顯微鏡的十字準線❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣，然后直到在目鏡中觀察到最低雙折射旋轉偏振器☾☽❄☃。接下來♀☿☼☀☁☂☄，旋轉晶體雙折射儀直至完全熄滅⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。
如果伯特蘭透鏡的調焦望遠鏡有偏光顯微鏡☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；，對應的偏振器和分析器發送方位角使用這些光學元件中的其中一個時ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，可以執行⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯。沒有 載物臺 上的一個標本㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂，交叉偏振器☈⊙☉℃℉❅，并插入目鏡望遠鏡觀測管或擺動伯特蘭透鏡的光學通路㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。聚焦望遠鏡或客觀上伯特蘭透鏡后孔ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。一個黑暗的偏振交叉可以觀察到明亮的區域側翼的懷抱十字架上웃유ღ♋♂，這應該是垂直和水平方向最大滅絕（圖4 （ a ））❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。在大多數情況下㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦，水平和垂直分量的偏振交叉場中心的寬和窄的周邊⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯。
偏振交叉的幾何形狀源于在 聚光鏡 和客觀的球面透鏡表面的去極化作用①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯，并可能會發生變化的大小和形狀取決于透鏡系統質量（株減少或消除）⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。然而❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，在大多數顯微鏡偏振交叉存在是正常的✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅，一般不能被認為是一個工件☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；。交叉應該集中在視（目鏡十字線疊加時）出現在南北和東西方向完全一致✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。如果這不是的情況下（圖4 （ c ）中示出）웃유ღ♋♂，偏振器和分析器應該旋轉的組合ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ，直到達到正確的方向⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。如上所討論的ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ，完美的偏振交叉對齊（因此ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，偏振片）的透射軸在零攝氏度是必不可少的補償器中的光學路徑的相位差板或帶或不帶進行定量測量的雙折射方位角❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。偏振交叉引用校準也是有用的ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，如果在山上一個固定的偏振片或分析儀偏離❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。
偏光顯微鏡對應的最后一步是調整 聚光鏡 孔徑光闌♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃，所以偏振交叉明亮的外部區域是可見的物鏡孔徑的邊緣被阻止①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯。圖4 （ b ）示出了適當調整的 聚光鏡 膜片⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。此步驟顯著提高的顯微鏡光學系統的消光系數㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦，在無畸變模式（沒有伯特蘭透鏡的調焦望遠鏡）觀察時⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯，該字段將出現最大暗⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。后在顯微鏡已對齊和校準的偏振軸㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂，它是雙折射標本進行定量分析做好準備✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。