奧林巴斯顯微鏡：萊因伯格照明系統的介紹
光學染色 的一種形式❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰， 萊因伯格照明 （ Rheinberg Illumination ） ⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓，最初是展示皇家顯微學會和Quekett 的俱樂部（英格蘭）在一百多年前由英國顯微鏡朱利葉斯萊因伯格✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。這種技術是一個顯著的變化☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；，從低到中等功率暗場照明使用彩色明膠或玻璃過濾器提供豐富的標本和背景顏色❣❦❧♡۵。
可以的萊因伯格技術相比更熟悉的暗場照明☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；。在暗視野顯微鏡웃유ღ♋♂，臺下聚光器配置⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺，使來自燈的光的光線✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴，通過 聚光鏡 ☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；，將試樣通過只在很斜的角度ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ。遍歷 聚光鏡 的光錐的中心區域是閉塞裝置❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣，不透光的光闌直徑足夠大❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣，以防止光線直接進入顯微鏡物鏡⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。在更復雜的暗場 聚光鏡 -拋物面形☾☽❄☃，心形☈⊙☉℃℉❅，卡塞格林或 Leuchtbild - 閉塞的斜光線直射光的利用率只達到使用專門設計的鏡面⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。
在暗場照明㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦，選擇的 物鏡 的數值孔徑（通過一個物鏡的的光圈或漏斗停止或減少）㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂，所以ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ，從 聚光鏡 的光不能直接進入物鏡✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。唯一的光線⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾，并進入物鏡的光的反射❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣，折射或衍射的試樣時⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ，從 聚光鏡 的“ 一擊 ” 試樣的傾斜射線⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ。試樣♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃，然后出現明亮否則黑場❣❦❧♡۵，故名暗場照明❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。與之形成鮮明對比的黑場明亮的物體上增加已經解決的細節的可視性☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；。暗視野 聚光鏡 可以在圖1 中的插圖來近似取代的不透光的光闌時ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，綠色過濾器的中心☾☽❄☃，除去紅色斜光濾波器⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ，使未經過濾的白光通過㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。
位萊因伯格照明（圖1 中示出）⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾，這是關系到暗視野中ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，數種形狀的過濾器使用ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ。斜或外光線通過一個開闊的明視場 聚光鏡 通過一個環形（面包圈狀）濾波器中的一種或多種顏色（顯示在圖1 和圖 2 中的環形過濾器的紅色濾色器） ; 中央光線的光線通過另一點狀的過濾器裝配到圓形開口的環形過濾器♀☿☼☀☁☂☄，如在圖 2 中所示的幾種組合❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。我們的 物鏡 是在全開光圈㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。在這種特定的情況下✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴，試樣將顯示為綠色背景上（圖2 （ A ））㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉，黃藍色背景上（圖 2 （ b ））ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，或紅色背景上的綠色（圖 2 （ c ）是紅色） ✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。
制備用萊因伯格濾波器ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ，或制造的ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，透明的☈⊙☉℃℉❅，環形的㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂，如圖3 中所示的中央有圓形開口的色環的形式ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。在這些過濾器的商業化版本中✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅，透明色的斑點或 “ 中央過濾器 ” 附帶的一套緊貼到開口的圓環（圖 4 ）ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ。中央過濾器的直徑的通過增加從外圈（圖 4 （交流））❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣，單獨的過濾器的窄的黑環的尺寸❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，可以是多種多樣的（背景照明強度調制）㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。有效的組合ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ，包括：紅環✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅，紫羅蘭中央過濾器 ; 橙黃色環⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯，藍色中央過濾器①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯，等等⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。其他直觀有效的圖像是由用有顏色的中央過濾器使用一個明確的未著色環❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。例如ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，一個紅色的中央過濾器會產生一個明確的環紅色背景上的白色或無色的圖像☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；。
實際上㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂，外圈“ 變成了 ” 檢體的顏色和中央過濾器 “ 變成了 ” 背景顏色❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。也可以在外圈分為交替扇區的色彩⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾，如在圖 5 中示出ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。部門的過濾器是特別有效的防翹曲的布料♀☿☼☀☁☂☄，晶面⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓，硅藻ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，木節的長度⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ，寬度尺寸在將顯示在對比色的研究✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。
多年來♀☿☼☀☁☂☄，一些顯微鏡制造商在彩色凝膠出售萊因伯格過濾（類似到柯達雷登過濾）⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓，預切웃유ღ♋♂，以適應他們的顯微鏡臺下過濾環❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。圓環的外徑為31-35 毫米✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅，中央過濾器❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，通常使用具有 10倍 - 0.25 NA 物鏡 的直徑為15-18 毫米✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。在實驗室中使用柯達雷登過濾器或彩色過濾器被廣泛使用在科學供應 的房子和光學元件分銷商❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，這些過濾器也可以很容易制作⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯。明膠濾鏡可以通過切割中央過濾用軟木塞螟適當的直徑⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾，圓環⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓，可以制備通過仔細地在濾紙上畫一個圓圈✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴，用一把剪刀切割出來♀☿☼☀☁☂☄。在我們的實驗室☾☽❄☃，支持機械師構建一個的銅壓鑄削減環形濾波器的圓直徑相同我們萊因伯格過濾器支架㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。該模具可以迅速從醋酸或明膠彩色濾光片張郵票非常流暢界⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。可切割的環形濾波器的中心具有相同的軟木螟用于制備中央過濾☾☽❄☃。
有時⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤，它是困難的☾☽❄☃，提供了堅實的環狀的過濾器殼體內的中央過濾時ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，這些都是非常薄的醋酸鹽或明膠濾鏡①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯。在這種情況下㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦，你可以只是磁帶的中心環形濾波器雙面膠帶中央過濾過☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；，但請記住ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，中央過濾器和環形濾波器的色彩會增加✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅，所以使用一個非常黑暗的中央過濾器過濾器⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。中央過濾器✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴，在一般情況下⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ，應遠遠比環形濾波器暗☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；，允許標本突出的背景形成鮮明對比的是⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。我們經常放置兩個或三個相同顏色的中央過濾器堆棧中的⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾，調整光的透射率ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ，通過中央過濾件❣❦❧♡۵。萊因伯格過濾器還可以用玻璃過濾器❣❦❧♡۵，這是很方便的與這些過濾器的外殼時ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，臺下聚光器安裝㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。在這種情況下⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺，最好是簡單的磁帶到玻璃過濾器的中心的中央過濾♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃。對于那些有興趣在自己的過濾器✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅，一個更完整的討論是在李約瑟的 實踐使用的顯微鏡 ⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤，我們的參考書目中列出⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。
我們比較了明 ⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯、 暗場㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦，萊因伯格照明技術ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，使用的鹿蜱（ 蜱dammini ）☾☽❄☃，如圖6 的顯微照片⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ。第一個顯微照片（ a ）表示的在光照下的滴答聲⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。圖像的明暗對比✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅，很多細節是很難解決的☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；。圖 6 （ b ）示出相同的暗場照明下的滴答聲☈⊙☉℃℉❅，存在許多虱子的功能⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯，更高的對比度和細節是顯而易見的ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。虱子使用藍色的中央濾波器和一個黃色的圓環（參見圖 2 （ b ）條）⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓，導致增加對比度的效果ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ，類似于暗視野萊因伯格照明（圖圖 6 （ c ））⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯，但是⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾，具有令人愉快的藍色背景⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。在這個例子中❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣，暗場和萊因伯格的照明技術⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯，產生顯著的更好的顯微照片比明場⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。
在20 世紀 30 年代后期☾☽❄☃，卡爾蔡司制造的一種特殊的 聚光鏡 ㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂，Mikropolychromar ❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，設計✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴，生產美麗萊因伯格圖像❣❦❧♡۵。這 聚光鏡 生產出來的長ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，現在幾乎用不上❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣，但它包括了齊明聚光下有三個獨立控制的隔膜♀☿☼☀☁☂☄。最外層的隔膜控制該字段的直徑✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅，并且兩個較小的隔膜控制盤中央的光通過⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。各種顏色的環形透明環集的一部分✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。伴隨著這些組是一個透明的玻璃中央的磁盤漂亮地嵌合到環形圈的中央開口ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ。這種巧妙的 聚光鏡 的作者之一（M. 阿布拉莫維茨）已被用于在不同的放大倍率㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉，其中一些已經出現在出版物 全方位♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃，時代生活☾☽❄☃，“ 科學美國人 ” ❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰， 以及 國家野生動物保護 產生引人注目的顯微照片❣❦❧♡۵。
照明萊因伯格是適合 物鏡 ✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥，從2 倍到 100 倍不等㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。然而⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓，為了清楚地分開的內和外的顏色⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺，不透明的金屬或紙環應放在圍繞該中心的過濾器☧☬☸✡♁✙♆。，、＇：∶；。例如ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ，可能具有的不透明環的外徑為 10 倍的 物鏡 為15-18 毫米ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ，和 22 毫米的外徑可能會對最好為 60 倍的油浸物鏡ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。這是一個很好的主意ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，嘗試使用類似的中央過濾器如圖 4 所示☈⊙☉℃℉❅，以達到最佳的結果與萊因伯格照明☾☽❄☃。
為了研究纖維♀☿☼☀☁☂☄，原蟲❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣，紡織品⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯，昆蟲☈⊙☉℃℉❅，木節✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴，水晶⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯，或其他未染色的低反差的主體ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，顯微鏡應考慮加入萊因伯格照明庫對比度技術❣❦❧♡۵。這將是可以查看和照片標本產生視覺增強的圖像❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰，以及外型美觀❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。
從作者的最后一個注意事項：盡量顯微鏡制造商和/ 或獨立配件制造商ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ，他們生產萊因伯格的 聚光鏡 和過濾器使用顯微鏡✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。必要的組件將非常廉價的生產⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺，將極大地幫助顯微鏡顯微鏡照明萊因伯格