尼康顯微鏡:熒光激發塊的分類
落射熒光的干擾和吸收 濾色鏡 組合被安置在 濾色鏡 立方體 (或 光學塊 )☈⊙☉℃℉❅,并包括激發濾光片❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,二色性分束器(通常稱為反光鏡)ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ,和 光柵 (或發射)的 濾色鏡 ☈⊙☉℃℉❅,如在圖1 中示出(一)ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。使用本指南中選擇適當的 濾色鏡 設置為廣角熒光顯微鏡調查所用的發色團的激發和發射光譜特性相匹配⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ。作為一個例子♀☿☼☀☁☂☄,圖1 ( b )給出一個典型的高性能帶通發射藍光激發 濾色鏡 組合的光譜✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。尼康熒光濾光器組合中所提供窄❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,中웃유ღ♋♂,寬的通帶激發版本與相應的發射 濾色鏡 可與任何帶通或長波光譜特性㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。
紫外線激發 -尼康紫外線激發熒光 濾色鏡 組合包括四個仔細平衡的組合♀☿☼☀☁☂☄,包含著帶通或長波發射( 光柵 ) 濾色鏡 能夠選擇性地隔離通過一個窄或寬的區域⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾,藍色♀☿☼☀☁☂☄,綠色和紅色可見光的熒光波長的光㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。這些 濾色鏡 的組合涵蓋的激發波長范圍在330 和 380 納米的帶通帶寬度公司 10 ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ, 40 ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,和 50 納米之間✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。三組合采用相同的二色鏡ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ,而第四套有一個反射鏡具有較低的切配合其較窄的激發帶的波長✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。紫外線 濾色鏡 集包含長通或單通發射濾波器ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ。
紫 激發 -尼康紫激發熒光 濾色鏡 系列包括三種組合包含任帶通或長波輻射( 光柵 ) 濾色鏡 能夠通過一個窄或寬的區域⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓,藍色㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,綠色和紅色的波長選擇性地隔離熒光✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。這些組合覆蓋的激發波長范圍在379-420 納米的帶通寬度的檔案 10 ✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥, 22 ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,和 40 納米之間♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃。了兩種組合采用相同的二色鏡☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,而第三組有較低的波長截止㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,而其更短的波長的激發帶重合的鏡像⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ。
藍紫 激發 -尼康藍紫激發熒光 濾色鏡 組合包括四個組合⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,其中包括無論是帶通或長波發射濾波器( 光柵 )能夠選擇性地隔離通過一個窄或寬的區域⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤,青色❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,綠色熒光⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤,紅色波長❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。這些互補濾波器組涵蓋激發波長介于400-446 納米帶通寬度型材 10 웃유ღ♋♂, 20 ㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,和 40 納米♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃。三組合采用相同的二色鏡✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥,而第四組具有較高的波長上( 5 納米)切斷❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣,以符合其的其他組件具有鏡面㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。
藍色激發 -尼康藍色激發熒光濾波器補充包括六個平衡組合웃유ღ♋♂,包含著帶通或長波輻射( 光柵 ) 濾色鏡 能夠選擇性地隔離通過一個窄或寬的頻帶的綠色⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓,黃色웃유ღ♋♂,紅色熒光☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,和近紅外光譜區域☈⊙☉℃℉❅。這些 濾色鏡 組覆蓋的激發波長范圍在420 和 495 納米的帶通寬度的檔案 20 ⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺, 30 ❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰, 40 ⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺,和 70 納米之間✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。五組合采用相同的雙色鏡☈⊙☉℃℉❅,⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓,而第六集切斷較低的波長上增加采集的信號有一個鏡子⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。尼康藍色激發濾光片組合的帶通濾波器阻隔 濾色鏡 都有譜寬為40 納米⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。其中一個 濾色鏡 ( B-3A )被設計為可以采用鎢鹵素燈照明ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。
綠色 激發 -尼康綠色激發熒光 濾色鏡 組合系列包括6 塊無論是單通或長波發射( 光柵 ) 濾色鏡 能夠選擇性地隔離熒光黃色窄或寬的頻帶內⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾,橙色⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤,紅色和近紅外光譜區域①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯。這些 濾色鏡 的組合包括510 和 560 納米的帶通帶寬度公司 10 ☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;, 25 웃유ღ♋♂, 30 ❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,和 50 納米(窄☾☽❄☃,中ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,寬激發帶)的激發波長之間的范圍ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。三組合采用相同的二色鏡( 565 納米)☾☽❄☃,而其他三個波長具有較高的切割值( 570 或 575 納米)上的反射鏡ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。兩個六尼康綠色激發濾光片設置結合帶通 光柵 帶寬的60 和 75 納米的 濾色鏡 ⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。
黃色 激發 -黃色激發熒光 濾色鏡 從尼康組合包括兩個平衡集單帶通濾波器( 光柵 )能夠選擇性地隔離熒光的橙紅色光譜區域內㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。這些互補的 濾色鏡 組合包括與通帶的寬度在40 和 55 納米的 532 至 587 納米的激發波長范圍內㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。這兩種組合使用相同的長通雙色鏡( 595 納米切)⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。兩個尼康黃色激發濾光片設置納入通 光柵濾色鏡 帶寬為60 和 75 納米 ..
紅 激發 -尼康紅色激發熒光 濾色鏡 組合類別包括單塊集成了一個帶通 濾色鏡 能夠選擇性地隔離發生在深紅色熒光近紅外光譜區的發射( 光柵 )✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。在700 納米的阻擋濾波器的通帶的中心㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂,與帶寬為 75 納米( 663 至 738 納米)♀☿☼☀☁☂☄。 60 納米寬的激發帶㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,包括橙色和紅色波長涵蓋 590 至 650 納米的光譜范圍ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。 Cy5的的 HYQ 組合采用了長通雙色鏡ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,具有波長為660 納米❣❦❧♡۵,這是高于 10 納米的激發帶通截止的切口⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。
黃色熒光蛋白(YFP ) 激發 -尼康黃色熒光蛋白的熒光 濾色鏡 類包括一個單一的高性能均衡的組合✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅,有效地延長了熒光蛋白檢測波長較長的增強型綠色熒光蛋白( GFP )的 濾色鏡 設置所提供的功能黃******變異的GFP ( YFP EYFP )的❣❦❧♡۵。 YFP HYQ 濾色鏡 組合采用相對較窄的通帶的激發和發射( 光柵 )濾波器✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅,其目的是為了符合特定的光譜特性的增強型黃色熒光蛋白ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ,使熒光從YFP 衍生物排放分別評估其他熒光蛋白質㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。
雙頻 激發 -尼康雙波段熒光 濾色鏡 組合包括三個仔細平衡的組合☈⊙☉℃℉❅,包含雙通的激發和發射濾波器( 光柵 )㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,被納入一個單一的元素❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣,能夠選擇性地隔離同時從兩個熒光基團的熒光①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯。 濾色鏡 組中的每一個是與特定的熒光染料對為獲得最佳性能而設計的⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,盡管它們與具有類似的吸收光譜和發射光譜的熒光探針的替代對同樣有效☈⊙☉℃℉❅。利用精確的波段選擇⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,陡峭的帶通反射和透射區域☈⊙☉℃℉❅,多激發和發射信號之間的轉換是分開以最小的交叉干擾✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。
三頻 激發 -三的激發帶熒光尼康提供的 濾色鏡 包括兩個平衡塊包含三重通激發和發射( 光柵 ) 濾色鏡 能夠選擇性地隔離同時從三個熒光團的熒光發射♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃。每一個 濾色鏡 組是專為最佳性能具有特定的的三個熒光染料 組 ☈⊙☉℃℉❅,雖然他們是同樣有效的與的備用探頭組合具有類似的吸收光譜和發射光譜ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ。利用精確的波段選擇⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺,與陡峭的帶通反射和透射區域♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃,多激發和發射信號之間的轉換是分開的與最小interference. 三立方體ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ。
HYQ立方體 - HYQ尼康熒光 濾色鏡 組合組包括四個仔細平衡高性能集⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,其中包括帶通發射濾波器( 光柵 )在有限的選擇性分離熒光波長范圍❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。每個HYQ 濾色鏡 設置的命名反映了熒光染料的名稱㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,它主要是設計ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,但在其各自的激發范圍之內ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ,可應用的每一種組合的各種適當的熒光染料⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯。
尼康熒光濾光片設置總表
尼康所采用的 濾色鏡 的命名源于條款可以追溯到20 世紀 90 年代初的混合物☈⊙☉℃℉❅。當時㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,所有的尼康互補濾波器組合使用 硬涂層 濺射技術㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,但許多目前可用的 濾色鏡 利用新型柔軟的涂層方法生產⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯。雖然軟大衣更容易受到濕度和熱降解⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ,且必須更仔細地處理比硬涂層 濾色鏡 ⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,他們表現出更高的阻擋光密度值⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾,①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯,微調特定波長頻帶❣❦❧♡۵,并提供更大的方便⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯。了解尼康 濾色鏡 組合代碼命名規則提供了一種機制⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ,迅速 確定是否特定的一組特定的熒光將充分履行⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ。
尼康專有的字母數字濾波器的指定代碼的第一個字母表示的波長的激發光譜區域(例如㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉, UV ⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓, V ✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥, B ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,和 g ✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,這是簡單的縮寫紫外線⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ,紫色⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺,藍色⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓,綠色✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,分別)☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;。激發后的代碼的數量涉及激發濾波器的通帶的寬度: 1 中和寬的頻帶 激發 的窄頻帶 激發 ✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅, 2 ⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,和 3 很寬的頻帶 激發 ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。最后⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺,一個或多個字母的激發帶通大小號碼標識的 光柵濾色鏡 的特點㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。代碼字母 à 表示一個標準的長通 光柵濾色鏡 以最低的截止波長☾☽❄☃,而 乙 指定較高的臨界波長值一個長波發射濾波器的㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。帶通發射濾波器中帶有字母的 ê (指“ 增強 ” )웃유ღ♋♂,表明其優越的性能方面⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾,以消除交叉⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。 E / C 濾波器是柔軟的毛發干擾組合設計特異性探針ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ,如DAPI ㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂, FITC ❣❦❧♡۵, TRITC ☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,州和得克薩斯州紅獲得最佳性能ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。
紫外光激發
UV-2E / C - UV-2E / C 濾波器組合設計作為一個尖銳的紫外熒光截止濾波器塊❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。 濾色鏡 是用于產生高信/ 噪比的軟涂層類型❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。利用此組合的窄帶帶通 光柵濾色鏡 的設計顯著地減少或完全消除綠色和紅色的可見光的波長✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。
UV-1A - UV-1A的 組合被設計成具有窄的激發帶通(只利用 我 的汞光譜線)和二色鏡的通帶窄❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,最大限度地減少自體熒光和光漂白的一個 濾色鏡 塊ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ,用于紫外熒光☈⊙☉℃℉❅。
UV-2A - UV-2A的 濾色鏡 的組合被設計成一個標準的 濾色鏡 塊❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣,用于紫外熒光是最亮的紫外線 濾色鏡 ❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,設置在Nikon 調色板♀☿☼☀☁☂☄。
UV-2B - UV-2B的 組合被設計作為一個通用的 濾色鏡 塊ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ,提供更暗的背景和更好的對比度比 UV-2A的 濾色鏡 的組合的紫外熒光㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。
紫 激發
V-1A - V-1A的 濾色鏡 的組合被設計作為一個 濾色鏡 塊具有窄的帶通區域⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ,以減少自發熒光的紫色熒光激發☾☽❄☃。長通的排放 濾色鏡 ☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,可檢測的熒光染料的波長范圍很廣ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。
V-2A - V-2A的 組合作為一個標準的紫色熒光 濾色鏡 塊具有最大程度的通用性而設計的⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。隨著介質的激發帶通和長波發射濾波器♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃,產生的圖像是最亮的尼康紫濾波器組㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。
藍色熒光蛋白(BFP ) -的 BFP 濾波器塊結合了一個狹窄的激發帶✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥,發射用一個帶通濾波器限制自體熒光✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥,以及排除來自紅色和綠色的熒光團的發射檢測㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。這種 濾色鏡 的組合☈⊙☉℃℉❅,是優秀的成像藍色熒光蛋白的衍生物❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。
藍紫激發
BV-1A - BV-1A的 濾色鏡 的組合被設計作為一個 濾色鏡 塊的藍紫色熒光激發具有很窄的帶寬✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅,以盡量減少試樣的自體熒光①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯。長通的排放 濾色鏡 ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ,可檢測的熒光染料的波長范圍很廣☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;。
BV-2A - BV-2A 組合設計為標準的藍紫色熒光濾塊⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。隨著中激發濾光片帶通和長波發射濾波器☈⊙☉℃℉❅,產生的圖像與這個組合是最亮的尼康藍紫濾波器組ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。
BV-2B - BV-2B的 組合被設計成藍紫色熒光的 濾色鏡 塊⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,提供了一個比較暗的背景色和更高的對比度比標準的 BV-2A 濾色鏡 的組合⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。
CFP(青色熒光蛋白) - CFP 濾波器模塊結合了 激發 帶寬窄通發射濾波器來限制以及自發熒光排除檢測紅✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥,黃☾☽❄☃,和許多綠色發光的熒光染料ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。
藍光激發
B-1A - B-1A 濾波器組合設計與窄 激發 通帶⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺,以減少自體熒光漂白✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。阻的長通濾波器(發射)是能夠發送信號☈⊙☉℃℉❅,從綠色㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,黃色ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,橙色和紅色的熒光基團웃유ღ♋♂,具有顯著的吸收在上部藍色波長區域對應的激發帶通窗口⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。
B-2A - B-2A 濾色鏡 組合尼康藍光激發組是標準的 濾色鏡 設置⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。它的設計采用了寬激發帶通相比㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉, B-1A 結合的熒光團☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,以提供一個擴大的吸收窗口的設置也有較低的二色鏡和阻擋濾波器的波長⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺,產生增強的圖像的亮度相比⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺, 乙-1A 濾色鏡 設置♀☿☼☀☁☂☄。
B-3A - B-3A的 濾色鏡 的組合使用的相同的二色鏡和長通發射濾波器作為 B-1A 集⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓,但采用了一個很寬的激發帶♀☿☼☀☁☂☄,使得它適用于鎢鹵素燈照明⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓。這種結合可實現的一個顯著量的從綠色❣❦❧♡۵,黃色ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,橙色和紅色的熒光基團ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,在藍色波長區域具有吸收帶的信號的傳輸☾☽❄☃。
B-1E - B-1E的 濾色鏡 的組合的三組中的藍色熒光激發系列✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,利用帶通❣❦❧♡۵,而不是長波通ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,阻擋 濾色鏡 的主要區別在激發帶的寬度♀☿☼☀☁☂☄。阻帶通濾波器組中的每一個提供的性能適用于標記的異硫氰酸熒光素( FITC )(綠色發光)的成像標本⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤,而阻擋黃色✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥,橙色ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,紅色發射❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。 B-1E 組合使用一個窄帶的帶通激發濾光片結合帶通發射濾波器(阻擋)❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣。
B-2E - B-2E的 濾色鏡 的組合⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,采用了廣泛的激發帶通⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,延伸20 納米的低波長比激發帶的 B-1E 集⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。二色鏡和帶通 光柵濾色鏡 的規格是相同的 B-1E 和 B-2E 濾波器組合❣❦❧♡۵。
B-2E / C - B-2E / C 濾色鏡 的組合采用一個中等寬度的激發帶☾☽❄☃,連同一個稍微降低的發射帶通波長區域相比⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺, B-1E 和 B-2E 集✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。的性能進行了優化웃유ღ♋♂,同時提供改進的排除黃色到紅色的波長檢測多個標記實驗中流行使用的熒光團的數量❣❦❧♡۵。
綠色 激發
G-1A -綠色波長激發 G-1A 濾波器組合是一個狹窄的激發帶通設計①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯,以減少自體熒光☾☽❄☃,并盡量減少試樣的輻射暴露☾☽❄☃。阻的長通濾波器(發射)是能夠發送信號⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾,從黃色ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ,橙色①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯,紅色發光的熒光基團⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,在中央的綠色波長區域中有顯著的吸收⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。
G-1B - G-1B的 濾色鏡 組合也有類似的 G-1A 集組件配置文件ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ,將狹窄的激發帶通ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,以減少自體熒光和試件破壞♀☿☼☀☁☂☄,但不同的雙色鏡和發射濾波器切斷波長☈⊙☉℃℉❅。上較長的波長的發射濾波器的移位產生的圖像顯示偏紅由于增加阻塞的黃色發射⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。
G-2A - G-2A 濾色鏡 組合配置為標準的綠色 濾色鏡 塊ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,具有廣泛的應用到綠色波長激活了大量的熒光團激發通帶①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯。長波發射濾波器允許檢測的所有熒光波長較長的比黃色的光譜區域☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;。
G-2B - G-2B 濾色鏡 組合設計作為 G-2A 濾波器塊具有相同的 激發 特性㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉。然而⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺,更高的雙色鏡和發射濾波器截止波長①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯, G-2B 組產生的圖像具有較深的背景和顏色移朝紅♀☿☼☀☁☂☄。
G-2E / C - G-2E / C 濾波器組合設計多個標記實驗中所使用的一些流行的熒光探針具有最佳的性能⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ。一條狹窄的激發帶通提供選擇性 激發 ㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂,而帶通發射濾波器減少干擾發射紅光和近紅外熒光團✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。
CY3 HYQ - Cy3的 綠色激發濾光片組合配置類似 G-2E / C 組✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。然而✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅,具有更廣泛的激發通帶和寬的發射帶通㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂,包括較低的波長❣❦❧♡۵,通過 Cy3標記的 濾色鏡 塊⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,產生的圖像是明亮一些反映更黃的光譜區域發射的檢測⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。
黃 激發
Y-2E / C - Y-2E / C 濾色鏡 的組合為黃色波長激發的設計作為一個專業的 濾色鏡 設置為使用與得克薩斯紅和CY3.5 ☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,雖然激發帶寬跨越黃色波長(重疊的部分綠色區域)♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃,設定可以利用與其他熒光染料的范圍ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ。阻帶通濾波器的傳輸信號從橙色和橙紅色發光的熒光基團㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,同時消除最紅和近紅外發射☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;。
德克薩斯紅HYQ - 德克薩斯紅 HYQ 濾色鏡 組合 Y-2E / C 組也有類似的零件外形⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺,而是更廣泛的激發和發射帶通窗口⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ,允許它來傳輸更多的能量❣❦❧♡۵,并產生較亮的圖像ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ。由此產生的圖像也反映了額外的紅色熒光信號✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,由于紅色光譜區域中的較長的波長的發射濾波器的通帶的延伸❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。
紅 激發
Cy5的 HYQ - Cy5的 HYQ 紅色波長激發的 濾色鏡 的組合的目的是提供高能量的激發的熒光Cy5 標記的寬的激發范圍(黃 - 橙色〜紅色)☾☽❄☃,雖然可以設置為使用多種熒光染料❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。陡峭的濾波器的反射和透射區之間的轉換使能維持在與高亮度電平的寬通帶的使用產生的組合信號分離✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴。阻帶通濾波器的傳輸信號從遠紅外到近紅外的波長范圍內是最有效的使用的紅外 濾色鏡 的電子探測器웃유ღ♋♂,如光電倍增管和 CCD 相機沒有檢測到✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。
雙頻 激發
DAPI-FITC - DAPI-FITC的 濾色鏡 的組合被設計成用于同時檢測排放物熒光染料DAPI 和 FITC ☾☽❄☃,或其他的熒光探針具有相似的光譜特征的配對❣❦❧♡۵。雙窄的激發和發射頻段對應相應的藍色發射☾☽❄☃,耦合到綠色發光的藍色激發紫光激發特定區域♀☿☼☀☁☂☄。
FITC-TRITC - FITC-TRITC 濾波器的組合是專為同時檢測熒光染料FITC 和 TRITC ❣❦❧♡۵,或探頭對光譜相似排放㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。激發和發射濾光片帶通濾波器允許兩個信號通道❣❦❧♡۵,一個藍色的激發和綠色發射對應于特定的窄的區域ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,另一個綠色的激發和發射橙紅色⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯。
FITC-德克薩斯紅 - FITC-德克薩斯紅 濾色鏡 的組合的設計相比✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅,具有稍微不同的帶通區域為藍色的激發和綠色發射的 FITC-TRITC 集ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,以便更有效地激發FITC ⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。這些變化符合稍高的波長范圍為得克薩斯紅色(綠色激發紅光發射)頻段⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。多個帶通區域提供最佳的檢測☾☽❄☃,以最小的串擾♀☿☼☀☁☂☄,同時 FITC 和得克薩斯州紅或熒光光譜相似對可視化✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。
三頻激發
DAPI-FITC☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;, TRITC - DAPI-FITC-TRITC的 濾色鏡 的組合被設計成用于同時檢測排放物的熒光染料DAPI ☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;, FITC ⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤, TRITC 或其他具有相似的光譜特性的探針的組合㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。三個狹窄的激發和發射頻段對應相應的藍色發射㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,耦合到綠色發光的藍色光激發下⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,綠橙紅色發射激發紫光激發特定區域⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。
DAPI-FITC-得克薩斯紅 - DAPI-FITC得克薩斯紅 濾色鏡 的組合設計紫羅蘭激發稍微不同的通帶區域- 藍色的發光⒔⒕⒖⒗⒘⒙⒚⒛ⅠⅡⅢⅣⅤⅥⅦⅧⅨⅩⅪⅫⅰⅱ,藍色激發 - 綠光發射☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,當較標準組 DAPI-FITCⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ, TRITC ☾☽❄☃。該設計的目的是⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤,以更好地符合具有較高的激發和發射波長所需的德克薩斯紅⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯,相對值TRITC ✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥。多個帶通區域提供最佳的檢測❋❀⚘☑✓✔√☐☒✗✘ㄨ✕✖✖⋆✢✣,以最小的交叉和噪聲☾☽❄☃,同時可視化的 DAPI ❣❦❧♡۵, FITC ♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃,和得克薩斯紅或熒光光譜相似組合㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。
HYQ 濾色鏡 組合
TRITC HYQ - TRITC的的 HYQ 濾色鏡 組合綠色波長激發TRITC 和 DII 如熒光染料⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤,以提高性能ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ。一些綠色激發載通常使用在本申請中⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺,擴大激發通帶紅移的二色鏡切向這些熒光團的較高的信號電平①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯,并允許改進的檢測紅色熒光蛋白的熒光蛋白變體和遠紅熒光的比較蛋白 HcRed ♦☜☞☝✍☚☛☟✌✽✾✿❁❃。
CY3 HYQ - Cy3的 HYQ 綠色激發濾光片組合的 G-2E / C 組也有類似的零件外形❣❦❧♡۵,雖然它產生了更多的激發和發射能量⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓,通過擴大通帶窗戶㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂。此外㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂,發射通帶延伸到較低的波長(入黃)ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,從而在兩個明亮的圖像和黃橙色的色調偏向♀☿☼☀☁☂☄。這是推薦的 濾色鏡 的組合⒃⒄⒅⒆⒇⒈⒉⒊⒋⒌⒍⒎⒏⒐⒑⒒⒓,用于檢測的花青Cy3 標記的熒光探針✺ϟ☇♤♧♡♢♠♣♥,尤其是在多標簽技術♀☿☼☀☁☂☄,它減少從遠紅光和近紅外熒光團發射的干擾☈⊙☉℃℉❅。
得克薩斯紅HYQ - 得克薩斯紅HYQ 濾色鏡 組合使用的熒光探針得克薩斯紅色和CY3.5 優化❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰,具有更廣泛的激發和發射通帶比同類 Y-2E / C 組⑰⑱⑲⑳⓪⓿❶❷❸❹❺。由于由此產生的更高的信號電平㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,發射通帶向長波長延伸☧☬☸✡♁✙♆。,、':∶;,相對于 Y-2E / C 設定㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,這樣的組合產生更明亮웃유ღ♋♂,更偏紅色調的圖像ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。 得克薩斯紅的HYQ 組合提供改進的性能超出了上限的 Y-2E / C 發射帶波長發射的探針①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯,同時限制在深紅光和近紅外熒光團發射的干擾❣❦❧♡۵。
Cy5的 HYQ - CY5 HYQ 濾色鏡 組合是唯一的尼康專為高能量的紅色波長的激發ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,雖然使用熒光Cy5 的優化⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤,寬闊的橙黃色⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤,紅色的 激發 范圍是適合采用各種應用熒光染料❣❦❧♡۵。產生的熒光在遠紅外到近紅外波長的發射濾波器的通帶相對應的☈⊙☉℃℉❅,主要是對人眼不可見的㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,最有效的檢測需要使用的光電倍增管或CCD 攝像機ⒺⒻⒼⒽⒾⒿⓀⓁⓂⓃⓄⓅⓆⓇⓈⓉ。寬帶通濾波器的地區⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤,加上陡峭的剪切和切斷過渡⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤,保持最大的信號分離和信號噪聲比❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰, HYQ 濾波器系列的特點❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。
熒光蛋白 濾色鏡 組合
賦予GFP 長波發射( FGP ( R ) -LP ) - 賦予GFP 長波發射 濾色鏡 的組合☾☽❄☃,是一種長通版本賦予GFP 帶通濾波器的設置和設計賦予杜克大學博士 Sharyn 的㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦。此 濾色鏡 的設置是非常有用的用于熒光的研究利用wtGFP 和 EGFP ⓱⓲⓳⓴⓵⓶⓷⓸⓹⓺⓻⓼⓽⓾。隨著這個系列的其他 濾色鏡 ✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,集設計☈⊙☉℃℉❅,增加二次熒光強度(亮度)沒有相應增加噪音水平⒥⒦⒧⒨⒩⒪⒫⒬⒭⒮⒯⒰⒱⒲⒳⒴⒵❆❇❈❉❊†☨✞✝☥☦☓☩☯。通帶越陡✤✥❋✦✧✩✰✪✫✬✭✮✯❂✡★✱✲✳✴,所建立的干擾腔的數目增加的激發和發射濾光片ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ,允許濾波器的光譜之間的接近⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。由此產生更廣泛和更陡 濾色鏡 光譜允許的設置ⓣⓤⓥⓦⓧⓨⓩ,以提供更多的 激發 和捕獲更多的熒光強度♀☿☼☀☁☂☄。
賦予GFP 帶通發射( FGP ( R ) -BP ) - 賦予GFP 帶通發射( FGP ( R ) -BP ) 濾色鏡 組合是一個帶通版本賦予GFP 長通濾光片設置 Sharyn 博士設計賦予杜克大學⒜⒝⒞⒟⒠⒡⒢⒣⒤。此 濾色鏡 設置為利用wtGFP 和 EGFP 的熒光研究是有用的ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,是分布最廣的 GFP 濾色鏡 集ⓊⓋⓌⓍⓎⓏⓐⓑⓒⓓⓔⓕⓖⓗⓘⓙ。
活塞GFP 帶通發射 - 活塞GFP 帶通發射 濾色鏡 組合是范德比爾特大學博士大衛活塞設計一個帶通濾波器ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ。發射濾波器具有窄帶通ⓚⓛⓜⓝⓞⓟⓠⓡⓢ,是有用的㈧㈨㈩⑴⑵⑶⑷⑸⑹⑺⑻⑼⑽⑾⑿⒀⒁⒂,同時避免超過540 納米波長的自發熒光定量 EGFP 賦予綠色熒光蛋白的熒光❣❦❧♡۵。
黃色熒光蛋白帶通發射(YFP HYQ ) -尼康黃色熒光蛋白 YFP HYQ 濾色鏡 集設計ⅲⅳⅴⅵⅶⅷⅸⅹⒶⒷⒸⒹ,在一條狹窄的(20 納米)波長在藍綠光譜區域中帶傳輸激發照明㊀㊁㊂㊃㊄㊅㊆㊇㊈㊉,再加上綠色☈⊙☉℃℉❅,黃色發射檢測 30 納米通區域內❻❼❽❾❿⓫⓬⓭⓮⓯⓰。該塊是優化成像 YFP ①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩⑪⑫⑬⑭⑮⑯,青色熒光蛋白的雙染色技術㈠㈡㈢㈣㈤㈥㈦,同時保持歧視✵✶✷✸✹✺✻✼❄❅。